目前有機(jī)磷</a>農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法主要有兩大類(lèi)——色譜檢測(cè)法和快速檢測(cè)法。色譜檢測(cè)法是目前農(nóng)藥殘留主要的檢測(cè)方法，包括氣相色譜法、高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、薄層色譜法。其特點(diǎn)是檢測(cè)時(shí)間稍長(zhǎng)，但檢測(cè)精度高，可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供依據(jù)。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法是一類(lèi)快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留的方法，包括免疫分析技術(shù)、酶抑制法等。這兩類(lèi)方法各有所長(zhǎng)，在實(shí)際操作中應(yīng)根據(jù)具體情況選用。 <br />1色譜法</font></p><p><font face=>根據(jù)分析物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)的不同而進(jìn)行分離，將分析物質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)換成易被測(cè)量的電信號(hào)，并用記錄儀進(jìn)行記錄。目前應(yīng)用于食品中有機(jī)磷檢測(cè)的色譜法主要有氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法(TLC)和毛細(xì)管電泳法(CE)。 有機(jī)磷</a>和<a href=>氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的檢測(cè)新方法，最低檢出濃度為0.01—0.02 mg/kg。該法操作簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，測(cè)定結(jié)果可靠，且試劑用量少，能夠去除樣品中蛋白質(zhì)和脂肪等大分子雜質(zhì)，能夠滿足大量樣品的快速檢測(cè)要求。

1.1氣相色譜法(GC)

氣相色譜法(Gas chromatography)是一類(lèi)分離分析方法，它是根據(jù)分析物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的不同達(dá)到分離目的，并將分析物質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)換成易被測(cè)量的電信號(hào)，然后送到記錄儀記錄下來(lái)的方法。由于其具有分離效能高、選擇性高、靈敏度高、分析速度快等特點(diǎn)，且作為有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，目前已成為最典型、應(yīng)用最廣的分析方法。自20世紀(jì)60年代氣相色譜應(yīng)用于農(nóng)藥和藥物殘留分析以來(lái)，大大提高了農(nóng)藥和藥物殘留量的檢測(cè)水平。常用的檢測(cè)器主要有火焰光度檢測(cè)器(FPD)、氮磷檢測(cè)器(NPD)、電子捕獲檢測(cè)器(ECD)等。樣品前處理方法主要有固相萃取法(SPE)、固相微萃取法(SPME)、超聲波萃取法(UE)等。

1.1.1火焰光度檢測(cè)器(FPD)火焰光度檢測(cè)器是最為常用的檢測(cè)方法。王江等用固相萃取結(jié)合氣相色譜一火焰光度檢測(cè)器測(cè)定蔬菜中1 7種殘留的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時(shí)，檢出限為0.00～O.008mg/kg，且線性良好，重現(xiàn)性強(qiáng)，回收率高，完全能夠達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法的要求。劉川琴等用乙腈超聲波振蕩提取，火焰光度檢測(cè)器測(cè)定蘋(píng)果中常見(jiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時(shí)，19種有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)限范圍為1.0～5.0“g/L，該方法操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、檢測(cè)準(zhǔn)確，且滿足農(nóng)藥殘留分析要求，適用于大量樣品的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室日常分析。

1.1.2氮磷檢測(cè)器(NPD)氮磷檢測(cè)器對(duì)含氮、磷的有機(jī)化合物的靈敏度高于火焰光度檢測(cè)器。陳有根等用固相萃取，氮磷檢測(cè)器同時(shí)測(cè)定了蔬菜和糧食中5種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的含量。其最小檢出限均為2μg/kg，加樣回收率和重現(xiàn)性均符合國(guó)標(biāo)要求。陳霞等建立了凝膠滲透色譜凈化，GC-NPD同時(shí)測(cè)定蔬菜中24種

1.1.3電子捕獲檢測(cè)器(ECD)  電子俘獲檢測(cè)器是靈敏度最高的氣相色譜檢測(cè)器，同時(shí)又是最早出現(xiàn)的選擇性檢測(cè)器。吳剛等采用加速溶劑萃取儀萃取樣品，電子捕獲檢測(cè)器快速分析動(dòng)物源性食品中多種電負(fù)性農(nóng)藥殘留量，結(jié)果表明，50種電負(fù)性農(nóng)藥的最低檢出限在0.04- 2.6μg/kg之間。該方法具有分離效果良好，雜質(zhì)干擾少的特點(diǎn)。

1.1.4氣相色譜一質(zhì)譜法(GC-MS)  GC-FPD和GC- NPD法雖然以靈敏度高、定量準(zhǔn)確、成本低而被廣泛采用，但當(dāng)遇到組分不明的干擾物與被測(cè)物的峰相重迭或兩者的保留時(shí)間非常接近時(shí)，則難以判斷。而 GC-MS是解決這一問(wèn)題最有效的方法。它既有氣相色譜的高分離性能，又有質(zhì)譜準(zhǔn)確鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，可達(dá)到同時(shí)定性、定量的目的，在農(nóng)藥代謝物和降解物檢測(cè)方面具有突出優(yōu)點(diǎn)。李潤(rùn)巖等用頂空固相微萃取一氣質(zhì)聯(lián)用(HS-SPME-GC/MS)技術(shù)測(cè)定了草莓中二嗪農(nóng)、倍硫磷、殺螟硫磷、乙基對(duì)硫磷和乙硫磷5種有機(jī)磷農(nóng)藥，優(yōu)化了萃取條件和氣質(zhì)聯(lián)用條件，檢出限為5.2- 10.7μg/kg，可以滿足水果農(nóng)殘檢測(cè)的要求，并拓展了此技術(shù)的應(yīng)用范圍。建立了GC-MS測(cè)定蔬菜、水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的分析方法，最低檢出量在0.01-0.04 mg/L之間，符合農(nóng)藥殘留分析的要求，并建立了多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留在 GC-MS上得到很好分離的分析方法，解決了只以保留時(shí)間定性時(shí)出現(xiàn)結(jié)果假陽(yáng)性和保留時(shí)間重合的問(wèn)題。

1.2高效液相色譜法(HPLC)

高效液相色譜法(High performance liquid chromatography)是在高壓條件下利用溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相中的分配系數(shù)的差別進(jìn)行各組分分離。氣相色譜法對(duì)于一些熱不穩(wěn)定、極性很強(qiáng)、分子量較大和離子型農(nóng)藥或代謝產(chǎn)物的檢測(cè)有一定難度，而高效液相色譜法分離條件相對(duì)溫和，在這些殘留物的檢測(cè)上就顯示了其優(yōu)越性。

1.2.1  固相萃取一高效液相色譜(SPE-HPLC)固相萃取是最主要也是最常用的樣品前處理方法。張卓曼等建立了固相萃取高效液相色譜測(cè)定蔬菜中甲基對(duì)硫磷、三唑磷、乙基對(duì)硫磷、倍硫磷和辛硫磷5種有機(jī)磷農(nóng)藥的分析方法，檢出限介于0.10-0.17μg/g，完全符合蔬菜中痕量有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速分析要求。

1.2.2高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)

液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是通過(guò)一種內(nèi)噴射式和粒子流式接口技術(shù)將液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)接起來(lái)的檢測(cè)方法，其原理與氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法類(lèi)似。潘見(jiàn)等采用高效液相色譜一串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定菠菜中13種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，結(jié)果表明，13種有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的定量限均小于9.0μg/kg，顯著低于日本肯定列表制度的限量。

1.3薄層色譜法(TLC)

薄層色譜法(Thin-Layer Chromatography)是20世紀(jì)30年代發(fā)展起來(lái)的一種分離和分析方法。所用儀器簡(jiǎn)單，操作方便，可以普及，但靈敏度不高。檢測(cè)農(nóng)藥殘留時(shí)，先用相應(yīng)的溶劑提取，經(jīng)過(guò)純化、濃縮后，在薄層硅膠板上展開(kāi)，顯色后進(jìn)行定性、定量測(cè)定。張蓉等用高效薄層色譜測(cè)定農(nóng)藥在水中殘留，在已檢測(cè)出的喹硫磷、三唑磷、甲基異柳磷、雙硫磷4種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的添加回收率和變異系數(shù)已經(jīng)達(dá)到了農(nóng)殘的基本標(biāo)準(zhǔn)。

1.4毛細(xì)管電泳法(CE)

毛細(xì)管電泳法(Capillary Electropheresis)具有分離效率高、快速、運(yùn)行成本低、樣品用量少等特點(diǎn)，近年來(lái)得到了迅速發(fā)展。毛細(xì)管區(qū)帶電泳和膠束電泳毛細(xì)管色譜(MECC)非常適用于那些難以用傳統(tǒng)的液相色譜法分離的農(nóng)藥殘留分析，分離度好，檢出限低。闕木旺采用膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜法(MEKC)技術(shù)對(duì)氧樂(lè)果、樂(lè)果、敵百蟲(chóng)這三種有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行分離，它們的檢測(cè)限分別為0.11μg/ml、0.06μg/ml、0.1μg／ ml，效果顯著。

2快速檢測(cè)法

2.1免疫分析技術(shù)

免疫測(cè)定(Immunoassay, IA)是利用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)標(biāo)本中微量物質(zhì)的方法，該法應(yīng)用范圍極為普遍（任何生物只要能獲得相應(yīng)的特異性抗體，即可用免疫測(cè)定進(jìn)行檢測(cè)）。應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析的免疫分析技術(shù)主要有放射性免疫分析(RIA)和酶聯(lián)免疫分析(ELISA)。其中，ELISA發(fā)展較快，現(xiàn)已成為應(yīng)用最廣泛的技術(shù)之一。農(nóng)藥殘留的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)自從20世紀(jì)90年代以來(lái)得到了全面迅速的發(fā)展，美國(guó)化學(xué)會(huì)(AOAC)已經(jīng)將免疫分析與氣相色譜、液相色譜同時(shí)列為農(nóng)藥殘留分析的三大支柱技術(shù)。Yan Liu [12]等發(fā)現(xiàn)一種D12-B5單克隆抗體在檢測(cè)甲基對(duì)硫磷、毒死蜱、倍硫磷、殺螟松等有機(jī)磷農(nóng)藥具有顯著的特異性，并且檢測(cè)效果良好。

2.2酶抑制法

酶抑制技術(shù)(Enzyme Inhibition)是利用有機(jī)磷等類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿醋酶的活性抑制作用而建立起來(lái)的用于分析其在食品中的殘留量的技術(shù)。該法無(wú)須昂貴的儀器，操作簡(jiǎn)便快速，但靈敏度較差，重復(fù)性、回收率還需要進(jìn)一步的提高。速測(cè)卡、快速檢測(cè)儀都是依據(jù)此技術(shù)研究開(kāi)發(fā)的。Akkad R等使用三種酯酶分析有機(jī)磷農(nóng)藥時(shí)，取得了不錯(cuò)的效果。

此外，生物傳感器也是基于此原理研究出來(lái)的。 Istamboulie G等的研究指出磷酸三脂酶分解某些有機(jī)磷農(nóng)藥的可能性，以此研究出了一種新的生物傳感器，用以選擇性檢測(cè)毒蟲(chóng)畏和毒死蜱。

2.3其他檢測(cè)方法

太赫茲(THz)時(shí)域光譜技術(shù)是近年來(lái)才逐漸發(fā)展起來(lái)的遠(yuǎn)紅外光譜檢測(cè)新技術(shù)。該技術(shù)樣品制備簡(jiǎn)單，能夠避免色譜等技術(shù)中復(fù)雜的前處理過(guò)程，能夠提供很高的信噪比，且THz波能量低(1 THz能量約為4.1 meV).可作無(wú)損傷分子探測(cè)和識(shí)別，同時(shí)檢測(cè)速度快（系統(tǒng)只需幾十秒即可得到樣品的THz時(shí)域光譜）。顏志剛等研究了有機(jī)磷農(nóng)藥乙酰甲胺磷的太赫茲光譜，為利用THz技術(shù)檢測(cè)農(nóng)藥分子提供了參數(shù)，也為進(jìn)一步檢測(cè)食品中的農(nóng)藥殘留打下了基礎(chǔ)。

3總結(jié)與展望

綜上所述，有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)各有其特點(diǎn)，應(yīng)根據(jù)不同的要求選擇不同的檢測(cè)手段，以獲得期望的結(jié)果。有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析發(fā)展趨勢(shì)是基本檢測(cè)方式的改變。近些年，隨著食品安全意識(shí)的逐步提高和食品多樣化、成分復(fù)雜化，人們對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析方法提出了很高的要求。農(nóng)藥殘留分析日趨向系統(tǒng)化、規(guī)范化、自動(dòng)化方向發(fā)展。在人們環(huán)保意識(shí)的逐漸加強(qiáng)，新的農(nóng)藥品種不斷進(jìn)入市場(chǎng)的條件下，對(duì)農(nóng)藥檢測(cè)限的要求將會(huì)更低，更加靈敏可靠的檢測(cè)技術(shù)有待進(jìn)一步發(fā)展。